5.2　裝袋方法

　　首先拉開菌袋一頭，另一頭觸地，向袋內(nèi)填料，裝滿后，將菌袋口撰住，套上塑料套環(huán)，蓋上封口膜，用橡筋套住，然后翻轉(zhuǎn)菌袋，從另一頭繼續(xù)填料，并用手壓實，填滿料后，再上套環(huán)，封膜，套橡筋。一般每袋裝料量控制在5斤左右。另外，可采用機械裝袋，根據(jù)裝袋機的不同，選擇合適的操作方法和配套物資。裝好的菌袋，用編織袋鋪地，避免磨破菌袋，整齊碼放。完成裝袋后，即可入甑滅菌。

　　6　常壓滅菌

　　以外源常壓蒸汽滅菌鍋為例，首先在地面上擺放磚塊，磚間間距12cm，根據(jù)供給蒸汽的鍋的產(chǎn)生蒸汽的能力，可調(diào)整擺放磚底區(qū)域的大小（一般為1000袋/鍋），磚上鋪編織袋，避免毛刺扎破菌袋，然后將菌袋整齊堆碼在磚底座上，用塑料膜蓋住，用沙袋將塑料膜邊緣密封。最后將煤車裝滿，并點火推入燃燒灶內(nèi)，加熱鍋內(nèi)水產(chǎn)生蒸汽，即開始滅菌。

　　滅菌過程中要注意4點：

　?、贁[袋要平穩(wěn)，下大上小，防止倒堆，并留好蒸汽通道，使蒸汽更好的加熱菌袋；

　　②鍋內(nèi)水沸騰4小時后，袋內(nèi)料溫才可基本達到100℃，然后再維持此溫度10小時后，方可停止加熱，停止加熱后，不急于下甑，待菌袋在甑內(nèi)悶4小時后，方可出甑冷卻；

　?、鄞a袋要注意不易過多過緊，會直接影響滅菌效果，造成損失；

　　④滅菌過程中注意鍋內(nèi)水位，及時補充，避免鍋內(nèi)水燒干，亦不可經(jīng)常加水，會導致滅菌溫度不穩(wěn)定，導致滅菌失敗。

　　7　冷卻和接種

　　7.1　冷卻

　　滅好菌的菌袋，從滅菌甑取出后放置在干凈、通風，并利于轉(zhuǎn)運接種的區(qū)域進行冷卻。冷卻期間應(yīng)防止二次感染，冷卻區(qū)域周圍不能有霉變的物質(zhì)，并在冷卻前提前噴施克霉靈或漂白粉水溶液對環(huán)境進行消毒處理。菌袋冷卻至30℃時，即可開始接種。

　　7.2　接種準備

　　接種是生產(chǎn)環(huán)節(jié)中的關(guān)鍵，在接種前，需要對接種箱進行清理，并用消毒劑對接種箱內(nèi)外進行消毒處理。然后將冷卻至合適溫度的菌袋放入接種箱一端，按每瓶菌種接12~15袋的比例，將合格的菌種用75%的酒精擦拭消毒后放入接種箱內(nèi)，并將接種工具、酒精棉球、酒精燈、封口報紙、小封口膜(小于套環(huán)，用于防止水分散發(fā)過快)，橡筋等放入接種箱。準備好后，放入一個鐵碗，內(nèi)裝約30ml甲醛，再放入適量高錳酸鉀，并迅速關(guān)閉接種箱門，消毒30分鐘后，即開開始接種操作。

　　7.3　接種方法

　　在完成接種準備后，接種人員需用消毒水對手進行消毒，然后接種箱一側(cè)一人，進行接種。首先接種人員從手洞將手伸入接種箱，用事先準好的酒精對手進行消毒，然后用對接種鉤及菌種瓶進行消毒，再用接種鉤挖松菌種，再揭開菌袋封口膜，迅速將菌種鉤入菌袋，并鋪滿整個口面，然后在菌種面上放上小塑料封口膜，再用封口報紙將口面封住，翻轉(zhuǎn)菌袋，再接另一頭。接好種的菌袋，輕放在接種箱內(nèi)沒有放菌袋的另一端。完成接種后，將菌袋取出，放入培養(yǎng)室進行菌絲培養(yǎng)。