【作者】盛立柱 宋冰 戴月婷 李丹 付永平 李玉
【機構】吉林農業(yè)大學農學院 吉林農業(yè)大學食藥用菌教育部工程中心
摘要:以刺芹側耳菌絲球為受體,潮霉素(Hyg)為篩選標記,應用農桿菌介導法對刺芹側耳菌絲進行了遺傳轉化研究。潮霉素敏感性測試結果表明,刺芹側耳Hyg耐受濃度為50mg/L。農桿菌介導的刺芹側耳菌絲最佳遺傳轉化體系為:菌液濃度OD600=0.6–0.7,侵染時間30–35min,共培養(yǎng)時間2d,侵染液和共培養(yǎng)培養(yǎng)基中乙酰丁香酮(AS)濃度為1mg/m L;經潮霉素抗性篩選、PCR鑒定和GUS活性的組織化學分析,表明外源基因GUS已轉入到刺芹側耳菌絲中,并獲得表達。本實驗成功地建立了穩(wěn)定的農桿菌介導的刺芹側耳遺傳轉化體系。
基金:國家重點基礎研究發(fā)展計劃(2014CB138305); 國家自然基金項目(31471926); 省技廳項目(20140101149JC);
關鍵詞:刺芹側耳; 菌絲球; 農桿菌; GUS染色; 轉化體系;
【機構】吉林農業(yè)大學農學院 吉林農業(yè)大學食藥用菌教育部工程中心
摘要:以刺芹側耳菌絲球為受體,潮霉素(Hyg)為篩選標記,應用農桿菌介導法對刺芹側耳菌絲進行了遺傳轉化研究。潮霉素敏感性測試結果表明,刺芹側耳Hyg耐受濃度為50mg/L。農桿菌介導的刺芹側耳菌絲最佳遺傳轉化體系為:菌液濃度OD600=0.6–0.7,侵染時間30–35min,共培養(yǎng)時間2d,侵染液和共培養(yǎng)培養(yǎng)基中乙酰丁香酮(AS)濃度為1mg/m L;經潮霉素抗性篩選、PCR鑒定和GUS活性的組織化學分析,表明外源基因GUS已轉入到刺芹側耳菌絲中,并獲得表達。本實驗成功地建立了穩(wěn)定的農桿菌介導的刺芹側耳遺傳轉化體系。
基金:國家重點基礎研究發(fā)展計劃(2014CB138305); 國家自然基金項目(31471926); 省技廳項目(20140101149JC);
關鍵詞:刺芹側耳; 菌絲球; 農桿菌; GUS染色; 轉化體系;