【作者】 鄭恒光； 陳君琛； 湯葆莎； 吳俐； 翁敏劼； 高慧穎； 

 

【Author】 ZHENG Hengguang;CHEN Junchen;TANG Baosha;WU Li;WENG Minjie;GAO Huiying;Research Institute of Agri-Engneering Technology,Fujian Academy of Agricultural Sciences;

 

【機(jī)構(gòu)】 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究所； 

 

【摘要】 采用熱水(80℃)提取和75%乙醇沉淀、Sepharose CL-4B凝膠過濾及DEAE Sepharose CL-4B陰離子交換等方法分離純化大杯傘(Clitocybe maxima)柄粗多糖,獲得傘柄多糖純品,制備多糖抗體;采用熱水法提取大杯傘菌絲體粗多糖。用碳二亞胺法將純化傘柄多糖與牛血清白蛋白進(jìn)行共價化學(xué)偶聯(lián),并將偶聯(lián)產(chǎn)物(擬糖蛋白)免疫兔子以制備抗血清,以酶聯(lián)免疫法檢測抗體滴度。依據(jù)該抗體與來自相同菌株的菌絲體粗多糖免疫反應(yīng)差異對這兩種多糖進(jìn)行免疫識別,結(jié)果表明:經(jīng)過親和層析純化后,第六次免疫抗血清對傘柄多糖的抗體滴度可達(dá)64K,而且對菌絲體粗多糖反應(yīng)呈陰性,顯示該抗體可識別這兩種多糖之間的結(jié)構(gòu)差異。 更多還原

 

【關(guān)鍵詞】 大杯傘； 傘柄多糖； 菌絲體粗多糖； 分離純化； 抗體制備； 免疫識別； 

【文內(nèi)圖片】

【基金】 福建省自然科學(xué)基金(編號:2010J01275);農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(編號:201303080)的部分研究內(nèi)容