【作者】李萌 郭曉紅 李多川
【機構】山東農業(yè)大學環(huán)境生物系
摘要：研究從嗜熱毛殼菌Chaetomium thermophilum中克隆了一個新的脂肪酶基因(lm)。其中DNA序列包含一個由870個堿基構成的開放閱讀框,編碼289個氨基酸,含有4個內含子,沒有信號肽序列。序列提交Gen Bank,登錄號為GU338248。將該基因在畢赤酵母中表達。在甲醇的誘導下,重組蛋白得到了高效表達,第6天的表達量最高,蛋白達到0.428mg/m L,菌物學報酶活力為19.77U/mg。SDS-PAGE檢測該蛋白的分子量為35k Da。該脂肪酶的最適反應溫度為60℃,具有熱穩(wěn)定性,在40–80℃熱穩(wěn)定,80℃處理60min仍有65%的相對酶活。該酶最適反應p H值為10.0,在p H 9.0–12.0酶活相對穩(wěn)定。該酶具有較好的熱穩(wěn)定性和耐堿性,具有良好的工業(yè)應用價值。
基金：Supported by the National Programs for High Technology Research and Development(2012AA10180402)； the National Marine Renewable Energy Research Foundation(SDME2011SW01)；
關鍵詞：嗜熱真菌; 分子量; 酶活; 最適溫度; 最適pH; 熱穩(wěn)定性;