【作者】李萌 郭曉紅 李多川
【機(jī)構(gòu)】山東農(nóng)業(yè)大學(xué)環(huán)境生物系
摘要：研究從嗜熱毛殼菌Chaetomium thermophilum中克隆了一個(gè)新的脂肪酶基因(lm)。其中DNA序列包含一個(gè)由870個(gè)堿基構(gòu)成的開(kāi)放閱讀框,編碼289個(gè)氨基酸,含有4個(gè)內(nèi)含子,沒(méi)有信號(hào)肽序列。序列提交Gen Bank,登錄號(hào)為GU338248。將該基因在畢赤酵母中表達(dá)。在甲醇的誘導(dǎo)下,重組蛋白得到了高效表達(dá),第6天的表達(dá)量最高,蛋白達(dá)到0.428mg/m L,菌物學(xué)報(bào)酶活力為19.77U/mg。SDS-PAGE檢測(cè)該蛋白的分子量為35k Da。該脂肪酶的最適反應(yīng)溫度為60℃,具有熱穩(wěn)定性,在40–80℃熱穩(wěn)定,80℃處理60min仍有65%的相對(duì)酶活。該酶最適反應(yīng)p H值為10.0,在p H 9.0–12.0酶活相對(duì)穩(wěn)定。該酶具有較好的熱穩(wěn)定性和耐堿性,具有良好的工業(yè)應(yīng)用價(jià)值。
基金：Supported by the National Programs for High Technology Research and Development(2012AA10180402)； the National Marine Renewable Energy Research Foundation(SDME2011SW01)；
關(guān)鍵詞：嗜熱真菌; 分子量; 酶活; 最適溫度; 最適pH; 熱穩(wěn)定性;