【作者】陳利鋒 Thomas M HOHN
【機構】南京農業(yè)大學植病系;農業(yè)部病蟲監(jiān)測與治理重點開放實驗室;Novartis Agribusiness Biotechnology Research;Research Triangle Park;
【摘要】為研究禾谷鐮孢菌Fusarium graminearum Schw.單端孢霉烯族毒素生物合成基因(產毒基因)在寄主體內的表達,作者構建了帶報告基因GUS((-葡糖苷酸酶基因)的質粒pGUSTRI6P5,并通過對野生型菌株的轉化獲得禾谷鐮孢高產毒菌株。該質粒含有由TRI5(禾谷鐮孢單端孢霉二烯合酶基因)啟動子(TRI5 Prom)驅動的GUS基因編碼區(qū)、潮霉素B抗性基因和擬枝孢鐮孢F. sporotrichioides的產毒調控基因TRI6(FSTRI6)。用pGUSTRI6P5轉化野生型菌株GZ3639后,在含潮霉素 B的培養(yǎng)基上選取抗性菌落,單孢分離獲單孢菌株(轉化子)。在GYEP(葡萄糖-酵母粉-蛋白胨)液體培養(yǎng)基上,轉化子B4-1和B16-1的GUS比活力強,15-AcDON(15-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇)產量高,且兩者呈正相關(相關系數(shù)(r)分別為0.9839和0.9523)。B4-1和B16-1兩個轉化子可作為研究禾谷鐮孢與其寄主相互作用的工具菌株。
【基金】國家自然科學基金;國家留學基金資助;
【關鍵詞】禾谷鐮孢; 單端孢霉烯族毒素; 報告基因; 轉化子;