【作者】朱衡；瞿峰；朱立煌；

【機(jī)構(gòu)】中國科學(xué)院遺傳所；中國科學(xué)院遺傳所 北京 100101；

【摘要】隨著生物技術(shù)的飛速發(fā)展,更加需要簡便、快速地提取高質(zhì)量的DNA。以往報導(dǎo)的提取真菌DNA的方法大都采用液氮研磨或酶解破壞細(xì)胞壁和膜的方式,從而導(dǎo)致繁瑣、復(fù)雜和費(fèi)時的提取過程。根據(jù)氯化芐在弱堿條件下與多糖上的羥基反應(yīng)形成醚從而使多糖長鏈斷裂的事實(shí),我們發(fā)展了一種全新的真菌DNA提取方法,該方法使氯化芐在pH9.0時與細(xì)胞壁多糖作用,破壞細(xì)胞壁,基因組DNA因而得以從細(xì)胞中釋放出來。新方法具有簡便、快速、價廉的優(yōu)點(diǎn),得到的DNA蛋白質(zhì)污染少、質(zhì)量較高、產(chǎn)量穩(wěn)定。對該法提取的DNA作進(jìn)一步的分子生物學(xué)分析,如限制性內(nèi)切酶酶解、RFLP分析、RAPD擴(kuò)增,都取得了令人滿意的結(jié)果。利用氯化芐提取真菌DNA的研究,迄今在國際、國內(nèi)均尚未見報道。   

【關(guān)鍵詞】DNA提取；細(xì)胞壁；氯化芐；

【基金】863生物領(lǐng)域第一主題資助；