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    利用氯化芐提取適于分子生物學分析的真菌 DNA


    【發(fā)布日期】:2018-01-01  【來源】:菌物學報
    【作者】朱衡;瞿峰;朱立煌;
    【機構】中國科學院遺傳所;中國科學院遺傳所 北京 100101;
    【摘要】隨著生物技術的飛速發(fā)展,更加需要簡便、快速地提取高質量的DNA。以往報導的提取真菌DNA的方法大都采用液氮研磨或酶解破壞細胞壁和膜的方式,從而導致繁瑣、復雜和費時的提取過程。根據氯化芐在弱堿條件下與多糖上的羥基反應形成醚從而使多糖長鏈斷裂的事實,我們發(fā)展了一種全新的真菌DNA提取方法,該方法使氯化芐在pH9.0時與細胞壁多糖作用,破壞細胞壁,基因組DNA因而得以從細胞中釋放出來。新方法具有簡便、快速、價廉的優(yōu)點,得到的DNA蛋白質污染少、質量較高、產量穩(wěn)定。對該法提取的DNA作進一步的分子生物學分析,如限制性內切酶酶解、RFLP分析、RAPD擴增,都取得了令人滿意的結果。利用氯化芐提取真菌DNA的研究,迄今在國際、國內均尚未見報道。   
    【關鍵詞】DNA提取;細胞壁;氯化芐;
    【基金】863生物領域第一主題資助;
     
     
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