南開大學生物系 蔣谷人 劉安西 周愛蓮
日本國立癌中心研究所對扣擔子菌類抑瘤的有效成分作了較全面的報道,但對其抑瘤機理,各家報道不一,作者以津白一號(TAI)純系小鼠植入白發(fā)性肉瘤S79作為腫瘤模型,以研究香菇多糖、口菇多糖的抑瘤機理:
一、材料:
香菇福建產(chǎn),口菇張家口產(chǎn),津白1號純系小鼠、TAI帶瘤(S79)小鼠,其余試劑為AR級。
二、方法:
1 擔子菌多糖的提?。阂詿崴崛?,乙醇分級部分沉淀,鯨蠟基三甲基銨分級沉淀,蠟酸分級部分抽提純化而得。
2 瘤株移植:剖取皮下肉瘤,迅速稱量,以4倍的生理鹽水制成細胞懸液,于每只小鼠的腹股溝皮注入0.2ml的細胞懸液(約含6X106個細胞)。成活率100%。
3 腹腔巨噬細胞吞噬功能的測定:于實驗鼠和對照鼠的腹腔內各注入0.2ml生理鹽水,數(shù)分鐘后將小鼠眼眶放血致死,抽取腹腔滲出液1ml,入入裝有少量肝素的試管內,并滴加雞紅細胞懸液0.1ml,混勻,放入兩片蓋片,于37℃下孵育30分鐘,取出晾干,甲醇固定,姬姆薩瑞氏染色。鏡檢100個巨噬細胞及其所吞噬的雞紅細胞數(shù),分別求出巨噬細胞吞有雞紅細胞的百分數(shù)(即吞噬率)和每人巨噬細胞內的平均雞紅細胞數(shù)(即吞噬指數(shù))。
4 脾臟切片和鏡檢:脾臟固定于Bouin氏液24小時,石蠟切片,厚度5μm,蘇木精伊紅染色。作組織學觀察。
三、結果:
1 擔子菌多糖的抑瘤作用與腹腔巨噬細胞吞噬功能的關系:如表9,隨著抑瘤率的增加,腹腔巨噬細胞吞噬百分率和吞噬指數(shù)也相應增高,二者呈正相關。
表9 藥物的抑瘤作用與腹腔巨噬細胞的激活
組別 鼠數(shù) 劑量
(mg/kg/日) 平均瘤重
(g)
抑瘤率
(%) 吞噬百分率
(%) P值 吞噬指數(shù) P值
對照組 7 2.862±1.593 58.00±12.14 1.248±0.314
香菇多糖 7 12×10 1.61±0.915 43.74 78.50±3.72 <0.01 2.212±0.166 <0.005
口菇多糖 8 12×10 2.515±1.81 12.12 74.00±4.65 <0.01 2.276±0.792 <0.005
2 擔子菌多糖的抑瘤作用與脾臟組織增長分化的關系:如表10,隨抑瘤率增高,其脾重/體重百分比也相應增高,由脾切片可見,脾中淋巴小結數(shù)增多,紅髓內巨噬細胞增多,說明脾臟處于迅速地增長和分化狀態(tài)。這是擔子菌多糖增強免疫機能抑瘤的又一證明。
表10 藥物的抑作用與脾臟的增長、分化(x±SE)
組別 鼠數(shù) 劑量
(mg/kg/日) 平均瘤重
(g)
抑瘤率
(%) 脾重/體重
(%) 脾橫切片鏡檢
淋巴小結數(shù) P值 P值
對照組 7 0.1ml/只X10 2.862±1.593 0.803±0.236 14.80±2.17 153.4±27.9
香菇多糖 7 12×10 1.61±0.915 43.3 1.367±0.378 21.80±5.56 <0.025 183.9±49.78 <0.15
口菇多糖 8 12×10 2.515±1.81 12.2 0.936±0.269 23.00±5.76 <0.01 207.33±45.73 <0.025
四、討論
由以上實驗可見,香菇多糖等抗腫瘤作用,表現(xiàn)了強烈的宿主介導性,不僅促使脾臟的增長和分化,而且有人報道香菇多糖作為協(xié)助者T細胞的特異恢復劑和刺激劑,是目前世界上所知道的最強最好的物質之一。