【作者】方衛(wèi)國(guó) 張永軍 馬金成 肖月華 楊星勇 裴炎

【機(jī)構(gòu)】西南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)中心西南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)中心 重慶400716

【摘要】擴(kuò)增與已知序列相連的未知序列是一項(xiàng)常用的分子生物學(xué)技術(shù)。與其它方法相比,目前在棉花上應(yīng)用的YADE法具有效率高,成本低和假陽(yáng)性低等特點(diǎn)。因此,作者嘗試將該法引入到昆蟲(chóng)病原真菌的分子生物學(xué)研究,并取得了成功,建立了適合于球孢白僵菌和金龜子綠僵菌的YADE的技術(shù)體系。類(lèi)枯草桿菌蛋白酶在昆蟲(chóng)病原真菌穿透寄主體壁時(shí)起重要作用,作者在已克隆的球孢白僵菌類(lèi)蛋白酶基因CDEP-1的基礎(chǔ)上,利用YADE法,克隆類(lèi)球孢白僵菌類(lèi)枯草桿菌蛋白酶基因CDEP-1的啟動(dòng)子CDEPP。序列分析發(fā)現(xiàn):CDEPP中沒(méi)有明顯的TATA和CAAT框,含有8個(gè)可能的碳調(diào)控因子的結(jié)合位點(diǎn)5’>(g/c)YggRg<3’和2個(gè)氮調(diào)控因子的結(jié)合位點(diǎn)——相隔很近的GATA。這與CDEP-1的表達(dá)受碳/氮抑制的結(jié)果一致。本文的結(jié)果將會(huì)為研究CDEP-1的表達(dá)規(guī)律奠定基礎(chǔ)。 

【基金】國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):30200183)； 國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863)資助項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):2001AA214051)；

【關(guān)鍵詞】昆蟲(chóng)病原真菌; PCR步移; 體壁降解酶; 上游調(diào)控序列;